Proteiinipitoisuuslaskin

Kategoria: Biologia
- huhtikuu 04, 2025
| |
Tyypilliset arvot vaihtelevat 0.5 - 2.0
Standardikuvetteilla on 1 cm polun pituus
Jos näyte laimennettiin ennen mittausta (esim. 5 = 1:5 laimennus)

Proteiinin pitoisuus, joka määritetään 280 nm:n absorptiivisuuden (A280) avulla, lasketaan Beer-Lambertin lain avulla:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

missä:

  • \( C \) = Proteiinin pitoisuus (mg/mL)
  • \( A \) = Absorptiivisuus 280 nm:ssä
  • \( \epsilon \) = Häviämiskerroin (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Kuveetin pituus (cm)

What is the Protein Concentration Calculator?

Proteiinin pitoisuuden laskuri auttaa määrittämään proteiinin pitoisuuden eri menetelmillä, mukaan lukien:

  • Absorptiivisuus 280 nm:ssä (A280): Nopea ja ei-tuhoava menetelmä, joka perustuu aromaattisiin aminohappoihin.
  • Bradfordin testi: Väriimetristä menetelmää, joka käyttää väriaineen sitoutumista.
  • BCA (Bikinhoninen happo) testi: Menetelmä, joka perustuu kuparin pelkistämiseen ja väriimetristä havaitsemiseen.
  • Lowryn testi: Hyvin vakiintunut lähestymistapa, joka käyttää proteiini-kupari vuorovaikutuksia.

How to Use the Calculator

Seuraa näitä vaiheita laskettaessa proteiinin pitoisuutta:

  • Valitse mittausmenetelmä (A280, Bradford, BCA tai Lowry).
  • Syötä tarvittavat arvot, kuten absorptiivisuus, laimennoskerroin ja häviämiskerroin (tarvittaessa).
  • Jos käytät standardikäyrämenetelmää (Bradford, BCA tai Lowry), syötä käyrän parametrit.
  • Napsauta "Laske" -painiketta saadaksesi pitoisuus tuloksen.

Benefits of Using the Calculator

  • Säästää aikaa automatisoimalla pitoisuuden laskentaa.
  • Tukee useita mittausmenetelmiä joustavuuden vuoksi.
  • Sisältää laimennuslaskurin erityisten pitoisuuksien valmistamiseen.
  • Vähentää inhimillisiä virheitä manuaalisissa laskelmissa.

FAQs

1. How accurate is the Absorbance (A280) method?

A280-menetelmä on yleensä tarkka puhtaille proteiineille, mutta siihen voivat vaikuttaa saasteet, kuten nukleiinihapot.

2. Can I use the Bradford Assay for all proteins?

Bradfordin testi toimii hyvin useimmille proteiineille, mutta voi antaa vaihtelevaa tulosta proteiinin koostumuksesta riippuen.

3. What is the advantage of the BCA Assay?

BCA-menetelmä on yhteensopivampi pesuaineiden kanssa ja sillä on laajempi lineaarinen alue kuin Bradfordilla.

4. How do I choose the correct extinction coefficient for A280?

Käytä julkaistuja arvoja tunnetuille proteiineille tai laske häviämiskerroin aminohappokoostumuksen perusteella.

5. Why do I need a dilution factor?

Jos näytteesi on laimennettu ennen mittausta, sinun on kerrottava laskettu pitoisuus laimennoskertoimella saadaksesi oikean lopullisen pitoisuuden.